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　　BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒檢測(cè)蛋白濃度的原理及特點(diǎn)

　　本生闡述：BCA 蛋白濃度測(cè)定試劑盒原理：

　　BCA(bicinchoninic acid)法蛋白濃度定量試劑盒是在世界上常用的蛋白濃度檢測(cè)方法之一BCA法基礎(chǔ)上改進(jìn)而成。，二價(jià)銅離子在堿性的條件下，可以被蛋白質(zhì)還原成一價(jià)銅離子(biuret reaction)，一價(jià)銅離子的BCA Solution A(含有BCA)相互作用產(chǎn)生敏感的顏色反應(yīng)。兩分子的BCA螯合一個(gè)銅離子，形成紫色的反應(yīng)復(fù)合物。該水溶性的復(fù)合物在562nm處顯示強(qiáng)烈的吸光性，吸光度和蛋白濃度在廣泛范圍內(nèi)有良好的線(xiàn)性關(guān)系，因此根據(jù)吸光值可以推算出蛋白濃度。

　　BCA 蛋白濃度測(cè)定試劑盒的特點(diǎn)：

　　1.步驟簡(jiǎn)單，45分鐘內(nèi)完成測(cè)定，比經(jīng)典的Lowry法快4倍而且更加方便。

　　2.靈敏度高，檢測(cè)濃度下限達(dá)到25μg/ml，最小檢測(cè)蛋白量達(dá)到0.5μg，待測(cè)樣品體積為1-20μl 。

　　3.BCA法測(cè)定蛋白濃度不受絕大部分樣品中的去污劑等化學(xué)物質(zhì)的影響，可以兼容樣品中高達(dá)5%的SDS，5%的Triton X-100，5%的Tween-20, 60, 80。

　　4.在20-2000μg/ml濃度范圍內(nèi)有良好的線(xiàn)性關(guān)系。

　　5. 檢測(cè)不同蛋白質(zhì)分子的變異系數(shù)遠(yuǎn)小于考馬斯亮藍(lán)法蛋白定量。

　　注意事項(xiàng)：

　　1.長(zhǎng)期不用時(shí)，Cu試劑與PBS稀釋液可置于2-8℃保存，如發(fā)現(xiàn)細(xì)菌污染則應(yīng)丟棄。BCA試劑在低溫條件下出現(xiàn)結(jié)晶沉淀時(shí)，可37℃溫育使其溶解, 不影響使用。

　　2.樣品中若含有較多干擾物質(zhì)時(shí)，請(qǐng)采用Bradford蛋白濃度測(cè)定試劑盒。

　　3.為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

　　4. 常用濃度的去垢劑SDS，Triton X-100，Tween不影響檢測(cè)結(jié)果，但受螯合劑(EDTA, EGTA)、還原劑(DTT，巰基乙醇)和脂類(lèi)的影響。實(shí)驗(yàn)中，若發(fā)現(xiàn)樣品稀釋液或裂解液本身背景值較高，可試用考馬斯亮藍(lán)(Bradford)蛋白濃度測(cè)定試劑盒。

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